Autor/autores:
Lucio M. Schiapparelli, Yi Xie, Pranav Sharma...(et.al)
La actividad neuronal inicia cascadas de señalización que culminan en diversos resultados que incluyen plasticidad neuronal estructural y funcional y cambios metabólicos. Si bien los estudios han revelado cambios transcripcionales específicos del tipo de célula neuronal dependientes de la actividad, el análisis cuantitativo imparcial de la dinámica...
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La actividad neuronal inicia cascadas de señalización que culminan en diversos resultados que incluyen plasticidad neuronal estructural y funcional y cambios metabólicos.
Si bien los estudios han revelado cambios transcripcionales específicos del tipo de célula neuronal dependientes de la actividad, el análisis cuantitativo imparcial de la dinámica inducida por la actividad específica de la célula en la síntesis de proteínas recién sintetizadas in vivo se ha complicado por la heterogeneidad celular del cerebro y la relativa baja abundancia de proteínas recién sintetizadas (NSP) dentro del proteoma.
Aquí combinamos la expresión dirigida de MetRS mutante en neuronas glutamatérgicas corticales definidas genéticamente con un control temporal estricto del tratamiento con el aminoácido no canónico, azidonorleucina, ANL, para biotinilar NSP dentro de un período corto después de la convulsión inducida farmacológicamente en ratones machos y hembras.
Mediante la purificación de péptidos etiquetados con biotina-alquinos pesados o ligeros y el uso de detección directa MS/MS de péptidos biotinilados, cuantificamos los cambios inducidos por la actividad en las NSP de neuronas glutamatérgicas corticales.
La convulsión desencadenó cambios significativos en ~300 NSP, el 33% de los cuales se redujeron por la convulsión. Las proteínas que median la plasticidad sináptica excitadora e inhibidora, incluidas SynGAP1, Pak3, GEPH1, Copine-6 y colibistina, y las proteínas remodeladoras de ADN y cromatina, Rad21, Smarca2, Ddb1, se sintetizan diferencialmente en respuesta a la actividad.
Las proteínas que probablemente desempeñen funciones homeostáticas en respuesta a la actividad, como los reguladores de la proteastasis, el control de iones intracelulares y las proteínas remodeladoras del citoesqueleto, son inducidas por la actividad. Por el contrario, la incautación disminuyó la NCAM recién sintetizada, entre otros, lo que sugiere una degradación inducida por la incautación.
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